刷网课平板推荐平价(适合刷网课的ipad)

　　同科生物|无缝克隆试剂盒常见问题与处理

　　一、平板上无克隆或克隆数目很少

　　1、可能刷网课平板推荐平价的原因刷网课平板推荐平价：引物序列不正确

　　解决方案：确认引物序列含有15 bp与载体插入区域完全一致的同源序列。

　　2、可能的原因：PCR产物不纯

　　解决方案：优化PCR扩增反应以得到单一PCR产物；换一种纯化方法刷网课平板推荐平价，纯化您的PCR产物。

　　3、可能的原因：反应体系中DNA浓度太低

　　解决方案：在重组反应中，加入推荐的DNA量。

　　4、可能的原因：不纯的载体或插入片段抑制重组反应

　　解决方案：推荐采用胶回收或离心柱法纯化DNA后进行重组反应。

　　5、可能的原因：转化过程中加入重组反应液过多

　　解决方案：重组反应液的转化体积不应超过转化细胞体积的1/10。

　　6、可能的原因：感受态细胞转化效率低

　　解决方案：更换新鲜、高效的感受态细胞。

　　7、可能的原因：培养基中加入错误或过多抗生素

　　解决方案：在转化平板中加入正确、适量的抗生素。

　　二、假阳性克隆数目多

　　1、可能的原因：克隆载体线性化不完全

　　解决方案：重新酶切您的载体，增加酶切时间，并胶回收纯化。

　　2、可能的原因：PCR使用的模板质粒抗性与所需克隆载体抗性相同造成的污染

　　解决方案：可在PCR反应之前先将模板质粒线性化；PCR产物用DpnI处理，消化模板质粒，然后再纯化。

　　3、可能的原因：转化用平板放置时间过长导致抗性失效

　　解决方案：确认平板新鲜配置，并含有正确、适量的抗生素。

　　三、克隆含有不正确的插入片段

　　可能的原因：PCR产物混有非特异性片段

　　解决方案：优化PCR扩增体系，提高特异性或胶回收纯化目的片段。

　　产品优势：本公司提供分子克隆领域所需全线产品，包含基因重组/克隆、电泳检测、核酸提取/纯化、PCR/qPCR/RT-PCR以及细胞因子等系列产品，各类产品均得到客户高度认可，且反馈良好。

标签： #刷网课平板推荐平价